- 【食いしん坊も】京都大学付属病院【学歴厨も】
342 ：卵の名無しさん[]：2011/07/17(日) 16:07:13.51 ID:LqlfdHMg0 - ループスモデルマウス由来のB細胞ハイブリドーマが認識する核抗原の検討
佐藤毅, 藤●●夫, 吉●元, 野●●樹, 大●●●郎, 臼●崇, 三●●世
京都大学大学院 医学研究科 内科学講座 臨床免疫学
Abstract ＜目的＞抗核抗体の病原性を明らかにする
ことを最終的な目的とし，MRL/lprマウス脾細胞から
抗核抗体を産生するB細胞ハイブリドーマ（HD）を分
離した．＜方法＞30週齢のMRL/lprマウス脾細胞を用
い，ミエローマ細胞SP2/0-Ag14との融合を行った．
HAT選択培地下で生存したB細胞HD培養上清が認識する
核抗原を1）HeLa細胞を抗原としたRNA免疫沈降法
（RNA-IPP），2）リコンビナント蛋白を抗原とした
ELISA，3）培養細胞抽出物を抗原とした免疫ブロット
法（IB）によりスクリーニングした．＜結果＞抗核
抗体を産生するHDが3種類（Hy11,64,104）得られた．
1）Hy11上清はRNA-IPPで5.8SリボソームRNAを沈降
したが，ヒトリボソームP抗原を固相化したELISAでは
陰性であった．2）Hy64上清はRNA-IPPで陰性，ELISA
では全U1RNP/U1RNP-70Kに反応したが，ヒトHeLa細胞
を用いたIBでは45kDaに反応し70K蛋白のアポトーシス
産物であるU1RNP-70Kapopを認識すると考えられた．
3）Hy104上清はRNA-IPPでU1RNAを沈降，ELISAで全
U1-RNP/U1RNP-Cに反応し，C蛋白を認識する抗体と
考えられた．＜結語＞これまで報告のないモノクロ
ーナル抗U1RNP-70Kapop抗体を含め，SLEと関連する
抗核抗体を産生するハイブリドーマを単離した．
|